在安裝時以及以后每隔一定時間,要由有資質的專業人員按照規定對每一臺生物安全柜的整體運行性能進行生物的和物理的認證,以檢查其是否符合國家及國際的性能標準。生物安全柜的檢測主要包括物理學檢測喝生物學檢測兩個方面,其中:
安全柜防護效果的物理學評估應該包括:
①. 安全柜的整體、HEPA過濾器的泄漏,
②.空氣向下流動的速率、進口空氣的速率,
③. 負壓/換氣次數,
④.氣流的穩定性(煙霧特征),
⑤. 以及警報和自控(互鎖)系統.
⑥. 漏電
⑦. 照度
⑧. 紫外線強度
⑨. 噪聲
⑩. 震動性的測試。
生物學評估包括:
①.對個體保護效果
②.對環境保護效果
③.樣品保護試驗
④.交叉污染試驗。
4.1下列情況之一時,必須對生物安全柜進行現場檢測
1)實驗室施工,生物安全柜搬到指定位置后。
2)生物安全柜移動位置時。
3)生物安全柜進行檢修后。
4)生物安全柜更換過濾器后。
5)生物安全柜的一年一度的常規檢測。
4.2 I級別生物安全柜的檢測
4.2.1密閉性檢測
4.2.2排風濾器的檢測
1) HEPA 濾器泄漏檢測,安全柜在正常的使用條件下用準確方法進行。
2) 多分散DOP或相當的氣溶膠通過率不大于0.01%。
4.3 II級生物安全柜檢測
4.3.1原則
進口的II級安全柜必須符合生產國相應標準,如:美國、加拿大標準NSF49,英國標準BS5726,德國標準DIN12950-10,法國標準NF X44201,澳大利亞標準AS2252.2等。
國產的II級生物安全柜生產廠家必須制定相應的企業標準,其性能指標不低于國外同類產品標準。出廠時必須按企業標準對每臺生物安全柜進行檢測并出具檢測報告,使用微生物進行的生物安全防護檢測不得省略。對于每個產品應提供產品性能數據單。質量控制試驗應包括:
4.3.2 煙霧試驗:
用發煙器械發煙,對煙的流動作直觀判斷。
1) 在工作面中線上方高于工作窗口上沿15cm處,從一端到另一端發煙,煙的流動應為向下垂直流線,無逆流,不得有死角和回流,也無煙霧從安全柜溢出。
2) 距工作窗口0.04m沿窗口外沿同樣發煙,煙流向柜內流動無溢出,工作表面無煙霧。
3) 如為推拉式工作窗口,沿工作窗口的外周邊發煙,煙流向內,無逆流無溢出,工作面無煙霧。
4.3.3氣流速度測定
4.3.3.1垂直送風氣流速度測定
1)儀器:準確度為讀數±3%的風速儀(alno8500型熱球)。
2)方法:柜內送風口下方的15m處,均勻布點。測點間距不大于12cm.測點布置不少于3行,靠內壁的那行距內壁15cm,每行數不少于7個測點。
3判定:垂直氣流均勻區所測平均風速是0.38m/s±0.025m/s,單點風速與所測平均風速之差不大于20%為合格。
4.3.3.2正面窗口進風的風速測定
用計算方法或實測方法測出進口的風速。
所測量或計算的進風的風速與生產廠家給定值之差小于0.025m/s為合格。
A1型為0.38m/s±0.025m/s.工作表面每0.3m寬,每秒的zui小氣流量應是0.002m3.
A2型為0.5m/s±0.025m/s. 工作表面每0.3m寬,每秒的zui小氣流量應是0.03m3.
B1和B2型為0.5m/s±0.025m/s. 工作表面每0.3m寬,每秒的zui小氣流量應是0.03m3.
4.3.4 過濾器檢漏試驗
4.3.4.1送風垂直HEPA和過濾器室和框架泄露試驗
1) 送氣HEPA的密閉周圍、濾器室和濾器介質要用激光粒子計數器掃描法檢測。無漏點,透過率不可超過0.01% 或潔凈度達到100級.
2) 用瓊脂平皿沉積法檢測,潔凈度達到100級為合格。
4.3.4.2排風HEPA及過濾器室和框架泄露試驗
4.3.4.2安全泄漏試驗
打氣檢漏 試驗前使生物安全柜處于全關閉狀態,即將風管和工作窗口關閉(可用密封膠帶密封)。靜態(斷電)時對生物安全柜內部充氣加壓至500Pa,觀察壓力保持情況。壓力30分鐘下降小于10%為合格?;蛘咦鞣试砼菰囼灍o漏點。
4.3.4.3排風HEPE檢漏和透過率試驗
1) 用激光粒子計數器,對排風的HEPE及其附屬的濾器室和支架等進行檢漏和透過率檢測, 沒有漏點,0.3≧μm粒子的透過率<0.01%為合格。
2) 生物氣溶膠檢測 用間接噴霧器把1-8×10-8濃度的懸液枯草芽胞或黏質沙雷氏菌發生氣溶膠,在安全柜正常工作情況下于HEPA上游攻擊,用2級安德森生物氣溶膠采樣器進行常規采樣,上游采樣濃度>300pfu/m3,在下游采樣結果陰性或不超過1pfu/ m3為合格。
4.3.5產品、個人、環境保護和交叉污染的生物試驗
必須用生物氣溶膠考驗安全柜的防護性能,包括下述內容。
4.3.5.1個人保護試驗
1) 一種方法是 在規定參數條件下運轉中,在工作面中央上方35cm,觀察窗的里面10cm的地方,用噴霧器霧化30ml懸液枯草芽胞或黏質沙雷式菌,噴霧方向朝外,懸液**的濃度為108個/ml。4個安德森生物氣溶膠采樣器,布置在開口中央模擬工作的一個圓柱體(軸線距工作面7.0cm,模擬1個手臂)的上下左右,距進入工作開口250Cm.處進行采樣,試驗進行30分鐘,全部采樣器采集的**不超過10個(cfu), 試驗重復進行3次。柜內對照一個平皿收到300pfu以上。**氣溶膠粒子中值質量直徑應在0.5mm ~3.0mm之間。
2) 另按一種方法 在圓柱體周圍放4個AGI,采樣入口在安全柜的前面距觀察窗6.3cm。其中2個AGI相距15cm,在圓柱體上面水平切面上,另外2個AGI-30相距5cm,在圓柱體下面2.5cm,處。另外2個2級安德森空氣微生物采樣器放在2側,進氣口水平面上,距離操作口15cm,距離側壁20cm。2個AGI放在進氣口水平工作面上方36cm,安全柜邊緣外面5cm處,.每一個距離中心15cm.).
AGI所有的采樣液體用47mm,0.22的濾膜過濾,貼在適當的培養基上培養24-28h,如果陰性繼續觀察到44-48h.
對于新型和重要改進的安全柜,上述試驗應在下列條件下進行:在原本進入氣流流速減去0.05±0.015m/s,在原本向下氣流流速加上和減去0.05±0.015m/s, 氣流流速用儀器直接測量。每臺安全柜都應作氣流檢測。
在作向下氣流調整時要用全部測量的平均速度。
在確定向下和進入氣流速度時應避免使用不適合的儀器。對于新的和做了修改設計的產品應對進入和向下氣流速度減去0.05±0.015m/sd 情況下重復上面的步驟。
合格標準:
每個試驗6 只AGI收到**不超過10pfu,2個裂隙采樣器30分鐘收到的不超過5pfu.試驗重復3次,對照都應陽性,一個平皿超過300個pfu.
4.3.5.2產品保護試驗
全部的工作面,放上沉降平皿。噴霧器放在距觀察窗底部外沿102 mm處,方向朝觀察窗,**濃度為(1-8)×10-6。一個圓柱體放在噴霧器下面50mm處,模擬1個手臂。試驗進行5分鐘,柜內沉降平皿收到的菌落數不超過5個,試驗需重復3次。
4.3.5.3交叉污染試驗
柜內全部工作面放上沉降平皿。噴霧器放在距工作面上方76-127mm,以一側壁為背景向另一側噴霧,**濃度為(1-8)×10-4。試驗進行5分鐘,結果在超過距攻擊一側356mm的平皿中不超過2個cfu. 2側攻擊均需3次。
4.3.5.4環境保護試驗
在上述攻擊試驗的同時在安全柜排風口用一臺2級安德森采樣器采樣30分鐘,收到的試驗菌不得超過2個cfu。
4.3.6.穩定性試驗
對II級生物安全柜應作抗顛倒和扭曲試驗
4.3.6.1.抗顛覆 按照UL 3101的第七部分執行
4.3.6.2當在接近頂部邊緣(反面)橫向施以110kg力時,在頂部前沿和側面頂部向前移位不超過1.6mm.
4.3.6.3工作表面抗壓力 在工作表面中央25×25cm的面積內平均分布23kg重量,工作表面沒有偏斜。
4.3.6.4抗偏斜 110kg放在柜的邊緣處,后面底部抬高不超過1.6mm.
4.3.7生產廠家應提供資料
每一臺生物安全柜的說明書中應有產品質量控制數據資料。
1) 壓力降/肥皂泡/識別氣體檢漏,
2) 個人保護,產品保護檢測資料
3) 環境保護檢測資料
4.4其它檢測
1) 溫升 工作4小時柜內溫升不超過8.50C.
2)光照度 柜內平均照度650 Lux。個人讀(眼)處不低于430Lux.
3)噪音水平 在正常工作狀態時,工作面上方38cm,,操作口外面30cm處的噪聲,(在zui大背景噪聲為57db)不超過67db
4)振動 在正常設定參數下工作,工作面中央10Hz-10kHz的振動頻率的振幅凈位移不超過2×10-4 in(5×10-6 m)rms。
5)漏電檢測 接地電阻和電極性試驗。
6)水漕漏水試驗 4升水1 小時肉眼看不到漏。
7)風機性能 在設定風速在沒有調控的情況下,壓力降低50%,新濾器進風量減少不超過10%。
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